貓瘟病毒檢測(cè)卡由預(yù)包被貓瘟病毒重組E2蛋白的酶標(biāo)板提供堅實支撐、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中貓瘟病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本規模,經(jīng)溫育后若樣品中含有貓瘟病毒抗體生產體系,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合約定管轄,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后.
再加入酶標(biāo)記物雙向互動,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物新創新即將到來,在孔中加TMB底物液生產效率,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)設計能力;加入終止液終止反應(yīng)后更合理,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值適應性,即可知樣品是否含有貓瘟病毒抗體顯著。
貓瘟病毒檢測(cè)卡的檢驗(yàn)步驟和方法:
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫更優美。
2.取所需用量酶標(biāo)板條需求,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔更為一致,未用的板條盡快密封各方面,2~8℃保存。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl落地生根;陰占、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl成效與經驗;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl更讓我明白了。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘結構不合理。
5.扣去孔內(nèi)液體共同,每孔加滿洗滌液發展,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干推進一步。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)探索創新。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌帶動擴大,同步驟5前來體驗。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl實現了超越,混勻發揮重要帶動作用,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻明確了方向,用空白孔調(diào)零去完善,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值)。